Oltre 75.000 volumi manoscritti, 70.000 archivistici, più di 100.000 autografi separati, oltre 800.000 volumi a stampa. Questi i fondi della biblioteca istituita da Sisto IV nel 1475. Visitandola si attraversano ambienti interessanti, come il salone Sistino, di Domenico Fontana (1587-89), riccamente decorato sotto la regia di Giovanni Guerra e Cesare Nebbia.